Das Theater Eisleben, das einzige professionelle Theater im Mansfelder Land, ist eine Spielstätte der Mansfeld-Südharz-Theatergemeinschaft. Das Haus mit rund 320 Sitzen pflegt ein konzentriertes Programm aus Schauspiel, Konzerten und Gastspielen für die ländliche Region zwischen Halle und dem Harz. Eisleben hat einzigartige kulturhistorische Bedeutung als Geburts- und Sterbeort Martin Luthers (1483 geboren, 1546 gestorben). Sein Geburtshaus und Sterbehaus sind seit 1996 UNESCO-Weltkulturerbe — Stätten, die jährlich Hunderttausende Pilger und Touristen anziehen. Das Theater pflegt die Luther-Tradition mit regelmäßigen Reformations-Stücken und historisch-religiösen Stoffen. Martin Luther wurde in Eisleben geboren und starb dort, sein Geburts- und Sterbehaus sind UNESCO-Weltkulturerbe.
In Eisleben endet jedes Jahr der Lutherweg — Pilger aus aller Welt erreichen die Stadt zu Fuß, und das Theater spielt zur Reformationszeit eigens Luther-Stücke für sie.